ELISA直接法测长叶车前花叶病毒（RMV）含量实验步骤

1. 将不同浓度的待检测RMV溶液作为样品液，在测定板每孔各加250ul,至冰箱（4℃）中孵育过一夜。
2. 孵育后，去除孔穴内抗原溶液，用PBS-Tween20溶液缓缓冲洗孔穴3次，每次3min，然后去净洗涤液。
3. 每孔穴加250ulRMV的酶标记抗体溶液（用1%牛血清白蛋白的PBS- ween20稀释）在恒温箱（37℃）里孵育3-6h,或6℃下过一夜。
4. 去除孔穴酶标记抗体溶液，用PBS-Tween20溶液缓缓冲洗3次每次3min，然后去净洗涤液。
5. 每孔穴加入新鲜配备的底物溶液250ul,室温放置0.5h，或者放置出现黄色。
6. 加入50ul3N NaOH，终止反应。
7. 对每孔穴的黄色溶液，测定449nm波长处的吸光值。

讨论

1. 如该聚苯乙烯塑料微量反应板*次使用，应分别用标准浓度的RMV溶液、RMV的抗血清及RMV与它的IgG形成的免疫结合物，进行期盼滴定法来测该聚苯乙烯塑料微量反应板对RMV抗原和它的抗体的吸附能力。
2. 在正式测样品前，用0.1mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液配置各种标准浓度的RMV溶液，依照实验步骤测定RMV各种标准浓度的A449nm值，以病毒标准浓度为横坐标，A449nm值为纵坐标绘制标准曲线，由此可以测出RMV包被的浓度。
3. 测出原始底物的吸光值，以便核准数据。
4. 对照标准曲线，就可算出样品液中RMV的含量。
5. 如无牛血清白蛋白，可用0.1%白明胶代替。
6. 对于不稳定的病毒，用中性缓冲液稀释。
7. 如有ELISA测定仪，可快速测定。
8. 脑源性神经营养因子(BDNF)ELISAKit
   人白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISAKit
   人活化素A(ACV-A)ELISAKit
   人神经调节蛋白1(NRG-1)ELISAKit
   人心钠肽(ANP)ELISA Kit
   人多巴胺D2受体(D2R)ELISA Kit
   人内吗啡肽-2(EM-2)ELISAKit
   人α-内吗啡肽(α-EP)ELISAKit
   人抑制素(INH)ELISA Kit
   人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA Kit
   人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISAKit
   人促睡眠肽(DSIP)ELISAKit
   人6-羟多巴胺(6-OHDA)ELISAKit
   人心纳素(ANF)ELISAKit
   人神经髓鞘蛋白(p2)ELISAKit
   人精氨酸加压素(AVP)ELISA Kit
   人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISAKit
   人微管相关蛋白2(MAP-2)ELISAKit
   人神经丝蛋白(NF)ELISA Kit
   人利钾尿肽(KP)ELISA Kit
   人神经降压素(NT)ELISAKit
   人神经激肽B(NKB)ELISAvKit