猪瘟病毒检测由于CSFV的高致病力和高致死率,它已给养殖业造成了巨大的损失。猪感染高致病力毒株后在潜伏期就可以造成传染,经历急性猪瘟或亚急性猪瘟临床症状的猪在出现症状前大量排毒,但耐过后的猪只体内有明显的CSFV抗体,且不再排毒。感染温和性毒株的猪呈慢性感染,在病死前会长期或间歇性地排毒。怀孕母猪可以通过胎盘感染胎儿导致流产、木乃伊化或产出弱猪、畸形胎等。先天性感染低毒力病毒的结果是产出持续性感染的仔猪,仔猪出现免疫耐受,不表现任何症状向外排毒。猪也有可能感染BVDV或BDV。尽管这些感染通常呈温和过程并且是自限性的,但有效的将它们同猪瘟病毒区分是很重要的。
猪瘟病毒检测的技术原理:
用来检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体的检测试剂盒。该试剂盒是用猪瘟病毒抗原包被的微量反应板,利用阻断ELISA原理来检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体。如果被检样品中存在猪瘟病毒抗体,它们就会阻断辣根过氧化物酶标记(HRPO)的抗猪瘟病毒的单克隆抗体。单克隆抗体与猪瘟病毒抗原的结合可以通过辣根过氧化物酶与底物的显色程度进行判定,即用酶标仪在单波长450nm或双波长450nm与620nm测定该反应体系的吸光度。当被检样品中含有猪瘟病毒抗体(阳性结果)时,显色就会变浅,当被检样品中不含有抗猪瘟病毒抗体(阴性结果)时,显色就会变深。样本的阻断率可以通过450nm波长样本吸光度与阴性对照吸光度的比值来确定。
猪瘟病毒检测的试剂:
一个ELISA反应板可以检测92份样品(另加两个对照,每个双孔),或46个未知样品,每个样品加双孔。双孔检测法有利于检测结果的准确性。
1. 用猪瘟病毒抗原包被的ELISA反应板
2. 洗涤液(10×)
3. 阴性对照
4. 阳性对照
5. 样品稀释液
6. 辣根过氧化物酶标记(HRPO)的抗猪瘟病毒的单克隆抗体
7. TMB底物
8. 终止液