Easy-Lowry蛋白定量试剂盒说明书

Easy-Lowry Protein Assay Kit

Easy-Lowry蛋白定量试剂盒

目录号：K2341

保存：BSA 标准品：2-8℃

       其  它 组  分：室  温

组分说明

Cat. No.                    K2341

Kit Size                    1000 次/微孔，50 次/试管

试剂 A                        50 ml

试剂 B                        25 ml

BSA 标准品 （2 mg/ml）     2 ml

产品简介

    Easy-Lowry 蛋白定量试剂盒是一种操作简便快捷的 Lowry 法蛋白定量试剂盒，可用于多种不同缓冲系统以及各种不同蛋白质的定量检测。Easy-Lowry 蛋白定量试剂盒是在 Improved-Lowry 蛋白定量试剂盒基础上进行优化改良的产品，其保留了Improved-Lowry 抵抗干扰能力较强的优点，并进一步简化了操作步骤，减少了检测时间，并且能得到与mproved-Lowry 蛋白定量接近的定量结果，其检测范围为 0-2000 μg/ml。

注意事项

 1.  本产品可以采用分光光度计（试管检测法）或者酶标仪（微孔检测法）测定蛋白浓度。

 2.  建议每次测定蛋白样品时，绘制标准曲线，以获得准确数据。

 3.  BSA 标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致（可用 1×PBS 或 0.9%生理盐水稀释）。

 4.  如待测样品中含较多的干扰物质（具体见附表 1），可采用 Bradford 法蛋白定量试剂盒（YJ0013）或其他蛋白定量

    产品。  

操作步骤

 1.  稀释 BSA 标准品：用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释 BSA 标准品。

管号        稀释液用量（μl）BSA标准品用量（μl）   BSA标准品终浓度（μg/μl）

A                  0                 200                       2

B                 200                200                       1

C                 200          200（从B管中取）               0.5

D                 200          200（从C管中取）              0.25

E                 200          200（从D管中取）              0.125

F                200                 0                         0（空白）

 2.  稀释试剂 B：将试剂 B 用去离子水稀释 8 倍混匀待用。

 3.  定量检测：

 3a.  试管检测法（蛋白浓度检测范围：0-2 μg/μl）

    1）按上表，将稀释好的 A-F BSA 标准品和待测蛋白样品（原液或稀释液）各 200 μl  分别加到作好标记的试管中。

    2）向各试管中加 1 ml 试剂 A 迅速振荡混匀，室温准确放置 10 分钟。

    3）向各试管中加入 4 ml 稀释过的试剂 B，迅速在涡旋仪上混匀，室温静置 30 分钟。

    4）用分光光度计测定 750 nm 下的吸光度值。

    5）绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。

 3b.  微孔检测法（蛋白浓度检测范围：0-2 μg/μl）

    1）按上表，将稀释好的 A-F BSA 标准品和待测蛋白样品（原液或稀释液）各 5 μl 分别加到作好标记的 96 孔板微孔中。

    2）向各微孔中加 50 μl 试剂 A，迅速用酶标仪振荡混匀，室温准确放置 10 分钟。

    3）向每孔中加入 200 μl 稀释过的试剂 B，迅速用酶标仪振荡混匀，室温静置 30 分钟。

    4）用酶标仪测定 750 nm 下的吸光值。

    5）绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。

注意：

  1）建议以去除背景值后的吸光值读数绘制标准曲线。

  2）由于操作误差导致标准品读数严重偏离线性曲线的应舍去。

  3）未知样品浓度可以从标准曲线方程中计算得出,  实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。

  4）如果得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品后再次测定。  

实验代做服务：