包涵体蛋白溶解液说明书

InclusionbodyDenatureReagent

Cat.No.  K0007   

保存：2 - 8 ℃       

组分说明

                                             Cat.No.      K0007A

                                             Volume       100ml

产品简介

      包涵体是重组蛋白因为过度表达、蛋白无足够时间进行肽链折叠，部分折叠中间态之间的特异性错误聚合形成的一种不溶性结构。这些基因表达产物的氨基酸序列虽然正确，而其立体结构是错误的，因此一般没有生物活性。包涵体一般含有50%以上的重组蛋白，其余为外源蛋白、核糖体元件、RNA 聚合酶、内毒素、外膜蛋白 mpC、ompF 和ompA 等、核酸（环状或缺口的质粒DNA），以及脂体、脂多糖等，无定形，呈非水溶性，只溶于变性剂如尿素、盐酸胍等。使用本产品提取包涵体蛋白，可增加包涵体蛋白的溶解性，提高包涵体蛋白的提取效率，变性剂可通过透析去除。

注意事项

 1.  本试剂含有变性剂，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。

 2.  在低于4℃的保存温度下易出现絮状沉淀，使用时恢复至室温，絮状沉淀溶解后即可进行后续步骤。

操作步骤 

 1. 用细菌裂解液或其他方法裂解菌液后提纯包涵体。

 2. 1g 包涵体湿重中加入8ml 包涵体蛋白溶解液（粗略估算包涵体湿重）。

 3. 加入溶解液后混匀，振摇孵育 30 分钟。

 4. 离心去除细胞碎片。

 5. 收集上清液，进行后续步骤测试。

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