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ELISA放大系统
更新时间:2011-06-22 点击量:1497

ELISA放大系统

   ,生物-亲和素系统(Biotin-Avidin System,简称BAS)

   生物素与抗生物素之间具有*的亲和力,可以缩短反应时间,达到快速检测的目的.另外,抗体和酶的生物素标记率高,又不影响其活性,每个亲和素分子能结合4个生物素,每个生物素能标记大量酶分子,使得ELISA的敏感性大大提高,生物素与亲和素的结合也极为稳定,不会在洗涤过程中脱落.BA-ELISA是在常规ELISA的基础上,结全生物素(Biotin)与亲和素(Avidin)的高度放大作用,形成的一种检测方法.BA-ELISA分为:

1,LAB法即酶联亲和素-生物素标记法(Labeled avidin-biotin,简称LAB).用辣根过氧化物酶直接标记亲和素,用生物素标记第二抗体.

2,ABC法即酶联亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法(Avidin-Biotin-Peroxidase Complex,简称ABC).如用链霉亲和素(Streptavidin),则形成链霉亲和素-酶联生物素复合物(Streptavidin-Biotin-Peroxidaes Complex,简称SABC).ABC法中,用生物素标记第二抗体,又用生物素标记过氧化物酶.在使用前30min,亲和素与酶联生物素以1:1的比例混匀.1个亲和素分子结合3个生物素分子,亲和素剩下的1个结合点与标记第二抗体的生物素结合,亲和素起桥联作用.ABC法比PAP(Peroxidase-antiperoxidase tech-nique)法敏感几十倍.

3,BAB法即酶联亲和素-生物素桥法(Bridged avidin-biotin,简称BAB).用游离亲和素或链霉亲和素作为桥联剂,将生物素标记后开成的复合物与酶标记生物素连结起来,然后进行样品的检测.由于标记抗体分子上连有多个生物素,因此,zui终形成的抗原-生物素标记抗体-亲和素-酶标生物素复合物可积聚大量的酶分子;加入相应底物后,产生强烈的酶促反应,大幅度提高检测的灵敏度.

 

沪公网安备 31011802001677号

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